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鸡胚接种小鼠肿瘤组织的操作步骤

放大字体  缩小字体 时间:2019-10-12 18:10:53  阅读:7104+ 作者:诺恩诺德医学研究中心

原标题:鸡胚接种小鼠肿瘤安排的操作过程

鸡胚绒毛尿囊膜接种肿瘤安排的惯例培育办法

一、鸡胚培育

种蛋用75%酒精清洗消毒,天然枯燥后放置于37.6-38℃,湿度为60%-80%培育箱用全自动恒温培育箱培育至第8天。培育箱用75%酒精完全擦拭,以保证其清洁、无菌。

二、肿瘤安排的制备

用小鼠制造肿瘤模型,建模成功后去除肿瘤,选取无显着坏死的肿瘤安排2-5g,用玻璃匀浆研磨制成悬液。

三、鸡胚模型的制造

1.将8日龄的鸡胚从培育箱取出,在照蛋器照射下用铅笔在蛋壳外表勾画出气室、胚体及鸡尿囊膜上大血管的方位。

2.于超净作业台上用75%酒精消毒鸡胚,待其天然枯燥。用钻孔器在鸡胚气室一端转一直径约2mm的小孔,用针头当心将内膜刺破。然后在鸡胚蛋壳外表预先定位好的大血管邻近,将外层硬的壳膜打磨出一方框,留意打磨深度不宜过深,避免损害内膜。

将外壳膜当心揭去,露出内方白色内膜,然后在内膜上滴加0.9%生理盐水能明晰看到鸡胚血管,内膜和尿囊膜愈加简单别离,用眼科镊悄悄揭去内膜即可,露出含有丰厚血管的尿囊膜安排。然后将已高压消毒的内径5mm硅胶圈(受试环)放入大血管穿插下方相对无血管区。

3. 将肿瘤安排滴参加尿囊膜上硅胶圈中

4. 无菌通明辅料关闭方框窗。气室端小孔用牙科模型蜡关闭。胚胎放回孵箱持续孵育120h。一切试验鸡胚均于滴加肿瘤安排后24h取掉硅胶圈。

5. 5天后取出鸡胚,调查鸡胚尿囊绒毛膜肿瘤的构成,一起制造病理切片染色调查 。

四、鸡胚绒毛尿囊膜能够接种小鼠肿瘤安排原因剖析

1. 前期鸡胚是免疫缺点动物,易承受异种安排的移植。

2. 鸡胚绒毛尿囊膜血管丰厚,为肿瘤安排供给丰厚的养分。

关于咱们

诺恩诺德医学研讨院(北京)有限公司,由国内外尖端专家组成,与多家科研院所、医院协作,在动物试验职业处于佼佼者。接受各种职业的相关动物试验,特别关于小鼠肿瘤模型的制备愈加专业,遭到业内人士的广泛好评。一起针对人源肿瘤异种移植模型(Patient-Derived tumor Xenograft,PDX)也在做相关研讨,而且获得不错的成果,信任不久的将来能够做到“个性化医治”,为肿瘤患者给予期望。

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